润达生物||口服精制卵黄抗体在家禽养殖中的应用原理

抗体，是迄今为止预防和治疗疾病的最佳天然药物。——引自《生物工程论》
近年来，随着集约化养殖的快速发展，尤其是肉鸡笼养的规模化发展，注射给药途径给养殖场带来极大不便，并且注射时抓鸡造成的应激很大程度上影响其生产性能。因此，在研发新产品时必须考虑到产品使用的便利性和有效性，站在养殖场的需求角度研发产品成为必然，可饮水或口服的产品将成为研发的主要方向。
一、卵黄免疫球蛋白的结构特异性
卵黄抗体是产蛋鸡受特定抗原免疫后产生的特异性抗体，并转移、贮存在卵黄中的免疫球蛋白-IgG，但是由于禽类卵黄抗体与哺乳动物IgG在结构和生物特性上存有诸多差异，为区分两种抗体，Leslie和Clem将其单独命名为 IgY。禽IgY是由两条轻链（2L）和两条重链（2H）组成的，IgY的稳定性远高于哺乳动物的IgG。

二、禽类消化道消化酶及内环境
1、胃蛋白酶的消化作用

胃蛋白酶作用于铰链区的重链间二硫键近C端侧，水解Ig后可获得1个F(ab’)2片段和一些小片段pFc’（图2）。F(ab’)2是由2个Fab及铰链区组成，由于免疫球蛋白（Ig）分子的两个臂仍由二硫键连接，因此F(ab’)2片段为双价，可同时结合两个抗原表位，故与抗原结合可发生凝集反应和沉淀反应。由于F(ab’)2片段保留了结合相应抗原的生物学活性的功能片段F(ab’)2，因而被广泛用作生物制品。
2、胰蛋白酶的消化作用

图3数据展示，卵黄抗体在胰蛋白酶2小时、4小时、8小时处理后，活性稳定，基本保持在较高的水平，经过实验验证，IgY能抵抗胰蛋白酶的水解作用（马春全等）。
3、胃酸PH值对卵黄抗体的影响

由于IgY缺少铰链区，抵抗动物胃酸的能力较高，同时对于胰蛋白酶和胰乳酶等也有一定的抗酶解降解能力，实验证明IgY分别与胰蛋白酶和胰乳酶温浴8小时后，IgY仍有活性。说明卵黄抗体能耐受PH值=3-11的考验（马春全等）
4、鸡体内温度
鸡体温在37-42℃之间，图5数据展示经过实验验证，卵黄抗体能抵抗65℃以下的温度的考验。

以上研究证明：抗体口服不受胃蛋白酶、胰蛋白酶和胃酸以及温度的影响。
三、卵黄抗体饮水预防和治疗禽类病毒病
特异性卵黄抗体在禽新城疫、禽流感、传染性支气管炎、小鹅瘟等禽病的防治方面发挥了重要作用（马鲜平等，2011）。
因蛋鸡在整个生命周期免疫程序比较健全，蛋黄中富含了新城疫（ND）、H9、传支（IB）、法氏囊（IBD）、腺病毒（FAdV）及H5、H7亚型禽流感等多种抗体，另外可通过特异性加强免疫，进行相应抗体的进一步提升。因此，从鸡蛋中提取的卵黄抗体属于多联多价抗体，可以有效预防和治疗多种家禽病毒性疾病。
NDV、H9、IBV、FAV、IBD等多种常见致病病原可通过多种途径感染鸡群，其中肠道和呼吸道是最为常见的途径。病原在肠道中快速复制并持续存在，引起肠道淋巴系统等免疫器官的损伤，并可通过粪便方式向体外大量排泄病毒，使环境中病毒载量的急剧上升，造成鸡群更广泛的感染和发病。因此，对于这类病原，若能从肠道途径入手，减少其复制，并降低其在环境中的病毒载量，即可显着降低疫病的发生和传播几率，口服卵黄抗体可有效清除肠道病毒，降低环境中病毒载量，预防疾病的发生。

四、卵黄抗体口服的作用机理
1、肠道保健的“清道夫”
口服抗特定病原的卵黄抗体后，卵黄抗体能够直接与病原抗原结合位点结合，形成抗原抗体复合物，改变病原抗原位点的完整性，阻断病原结合肠道上皮细胞的通路，并且能够阻止病原体的生理功能的表达，使病原体溶解成无害物质，通过粪便排出体外。如通过口服复抗-新流抗体，抗体与新城疫和流感病毒特异性结合，形成抗原抗体复合物，使其失去侵染细胞的能力，随粪便排出体外，这样可以大大降低肠道内病毒载量，降低鸡群发病几率。

2、中和体内病毒
口服IgY后，在消化液中多种蛋白酶及胃酸使其变性的作用下，部分抗体裂解成Fab、F（ab′2）和Fc小肽片段（如图8所示），其中F（ab′2）和Fab片段具有中和抗原的位点。这些小肽片段仍具有三级结构，被小肠吸收后能够进入体液循环，到达组织各部位，与相应的病毒表位结合，产生中和病毒的效应。

五、卵黄抗体的应用时机
1、填补免疫空白期
尤其是在肉鸡上，肉鸡在21日龄左右，ND、H9和IB母源抗体已降至低谷，此时使用富含抗ND、H9和IB的卵黄抗体可以通过被动免疫有效补充ND、H9和IB抗体效价，达到预防疾病的目的。
2、肉鸡21日龄新城疫活苗有效替代品
众所周知，21-35日龄是肉鸡生长速度最快的阶段，同时也是ND、H9和IB母源抗体最低的阶段，此时免疫新城疫活苗比较容易引发呼吸道疾病，必须选择合适的免疫方式提升ND效价，口服ND、H9和IB抗体可有效补充鸡体抗体效价，可帮助家禽安全度过最关键和最危险的阶段。卵黄抗体保护期为7天左右，因此我们建议21日龄和28日龄分别口服一次卵黄抗体，帮助家禽渡过危险期。
3、用于协助治疗家禽病毒性呼吸道、支气管栓塞、气囊炎等疾病
家禽呼吸道、支气管栓塞和气囊炎等疾病主要由H9、ND和IB等病毒性疾病原发感染，后继发大肠杆菌或支原体等引起的一类在蛋/种鸡、肉鸡等较为常见的呼吸道问题，通过口服卵黄抗体，能够有效补充H9和IBV抗体，降低肠道病毒载量，中和体内病毒，协同治疗病毒性呼吸道、支气管栓塞、气囊炎等疾病。
六、抗体在其他领域中饮水免疫和治疗的实践应用
1、抗体饮水治疗猪流行性腹泻（PED）
Kweon等（2000）使用PEDV免疫鸡，然后提取和浓缩卵黄抗体（IgY），在仔猪人工感染PEDV后，口服IgY的仔猪，存活率达到85%，而对照组存活率仅为53%。目前已经有很多养猪公司应用此项技术。
2、哺乳动物中抗体的应用
哺乳动物吃初乳获得母源抗体，获得坚强的免疫力，是抗体口服有效的做好佐证；在猪的饲料中添加抗卵状病毒卵黄抗体粉可有效预防猪发生腹泻（Hiraga et al., 1990; Ebina et al.,1990）；国内医药公司利用卵黄抗体技术制备了抗白色念珠球菌卵黄抗体，生产研发了以该抗体为主要成分的药物，用于治疗妇科炎症（傅颖媛，2007）。
家禽养殖疫病发生往往都是综合和混感，抗体口服中和消化道的病毒和血液中游离病毒，同时杀灭大量肠道内有害菌，减少细菌在鸡体内的含量（病原菌达到一定的数量时才会致病，而不是携带就致病），减少混感的可能性，减轻疫病导致的损伤，降低感染死亡几率。
目前，卵黄抗体以其独特的优势在动物疾病的治疗中得到了广泛的应用。利用卵黄抗体来预防或治疗动物疾病，不仅成本较低，而且治疗效率和安全性都比较高。因此，随着人们对卵黄抗体更加深入的研究，在未来动物疾病的紧急预防或治疗中，口服卵黄抗体将会发挥更大的作用。